試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品名稱：淀粉含量試劑盒(酶法)科研

規(guī)格：48樣 96樣

貨號(hào)：AS170

檢測(cè)方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：碳水化合物代謝系列

貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。

PSB（磷酸鹽緩沖液pH7.2） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20支/包

ModifiedSclohtens'Broth(MSB) 英文名稱：Modified Sclohtens' Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g

葡萄糖肉湯 英文名稱：Dextrose Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g

最小肉湯培養(yǎng)基 英文名稱：the Smallest Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

HB-PET自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 英文名稱：HB-PET Auto-Indection Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

m-遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基 英文名稱：M-Endo Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

CAYE培養(yǎng)基 英文名稱：CAYE Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

接種測(cè)試微生物瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Medium Ⅱ(for Transferring the Test Organism) 產(chǎn)品規(guī)格：250g

菌種和底層瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Medium I(foe Seed and Basal Layer) 產(chǎn)品規(guī)格：250g

無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基 英文名稱：Inorganic Salt Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

淀粉含量試劑盒(酶法)科研品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位間接染色試劑盒  

石蠟切組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾（PAS）法  50次

品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位直接染色試劑盒  

P16蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒  5次

P21蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒  5次

P16基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒  5次

P21基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒  5次

端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒  10次

端粒酶活性TRAP實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒  20次

人體hTERT表達(dá)實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒  20次

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。